You are here

Investigation of the Vitrification Ability of Mouse Embryos with Quartz Capillary (QC) Straws

FARE EMBRİYOLARININ VİTRİFİKASYONLA DONDURULMASINDA QUARTZ KAPİLLAR (QC) PAYETLERİN KULLANILABİLİRLİĞİNİN ARAŞTIRILMASI

Journal Name:

Publication Year:

Keywords (Original Language):

Abstract (2. Language): 
The most frequent problems in current embryo freezing are formation of harmful ice crystals and toxicity of cryoprotectants. In slow freezing techniques although, the cryoprotectants can be used in a low concentration, ice crystals are formed and in rapid freezing process where ice crystals are avoided, this time toxicity of cryoprotectants deteriorates cells. New technological product quartz capillary straws have an ultra high temperature conductivity by which they avoid the necessity to use high concentrations of cryoprotectants and also prevent the formation of harmful ice crystals. The aim of this study was to investigate the use of quartz capillary straws for vitrification of mouse embryos. The quartz capillary straws have only been used to freeze murine embryonic stem cells and have not been tried in any multicellular embryo studies so far. In the study total 40 mouse embryos were frozen in six treatment groups with various concentration and combination of glycerol, ethylene glycol and trehalose. However, no live embryos were achieved after thawing and in vitro culture of embryos. In conclusion, high temperature conducting quartz capillary straws were observed to be inconvenient in freezing mouse blastocysts by vitrification with the type, concentration and combination of cryoprotectants used in this study.
Abstract (Original Language): 
Bilinen yöntemlerle yapılan embriyo dondurma çalışmalarında, zararlı buz kristallerinin oluşumu ve kriyoprotektanların toksisiteleri, karşılaşılan en büyük problemlerdir. Kademeli dondurma işlemind e kriyoprtotektanlar daha düşük yoğunluklarda kullanılabilmesine karşın buz kristalleri oluşmakta; Vitrifikasyonda ise, buz kristallerinin oluşumu engellenirken bu defa kriyoprotektanların toksik etkilerinden kaynaklı hasarlar meydana gelmektedir. Yeni bir teknolojik ürün olan quartz kapillar payetler, çok yüksek ısı iletkenliği sağlaması sayesinde hem kriyoprotektanların yüksek yoğunlukta kullanılması zorunluluğunu ortadan kaldırmakta, hem de zararlı buz kristallerinin oluşumunu engellemektedir. Bu çalışmada, bu güne değin sadece sıçan embriyonik kök hücrelerinin dondurulmasında başarıyla kullanıldığı rapor edilen ancak, henüz herhangi bir multiselüler hücre çalışmasında denenmemiş olan Quartz Kapillar payetlerin, fare embriyolarının Vitrifikasyonla dondurulması üzerine etkinliğinin araştırılması amaçlandı. Altı farklı çalışma grubunda, gliserol, etilen glikol ve trehalose’un farklı yoğunluk ve kombinasyonlarının denendiği ve toplamda 40 adet fare embriyosunun dondurulduğu çalışmada, çözdürme ve in vitro kültür sonrasında hiçbir embriyonun canlılığını sürdüremediği belirlendi. Sonuç olarak, çok yüksek ısı transferi sağlayan quartz kapillar payetlerin blastosist aşamasındaki fare embriyolarının vitrifikasyonla dondurulması için, kullanılan kriyoprotektif madde tip, oran ve kombinasyonlarının uygun olmadığı kanaatine varıldı.
9-13

REFERENCES

References: 

Aksoy, M., Takahashi, Y., Hishinuma, M., Elsbeikh,
A.S., Tanaka, A., Kanagawa, H., 1999.
Influences of retrieval stages and glutathione
addition on post-thaw viability of quick frozen
Mouse Morula during in vitro culture.
Theriogenology 51, 681-687.
Berejnov, V., Husseini, N.S., Alsaied, O.A., Thorne,
R.E., 2006. Effects of cryoprotectant
concentration and cooling rate on vitrification
of aqueous solutions. Journal of Applied
Crystallography 39, 244-251.
Bucak, M.N., Tekin, N., 2007. Kryoprotektanlar ve
gamet hücrelerinin dondurulmasında kryopro-tektif etki. Ankara Üniversitesi Veteriner
Fakültesi Dergisi, 54, 67-72.
Erbach, G.T., Lawitts, S.A., Papaioannou, V.E.,
Biggers, J.D., 1994. Differential growth of the
mouse preimplantation embryo in chemically
defined media. Biology of Reproduction 50,
1027-1033.
Evecen, M., Pabuccuoğlu, S., Alkan, S, Ġleri, Ġ.K.,
2004. The effects of various BSA levels on
development in in vitro culture of mouse
embryos. Turkish Journal of Veterinary and
Animal Sciences 28, 337-342.
He, X., Eric, Y.H.P., Fowler, A., Martin, L.Y.,
Toner, M., 2008. Vitrification by ultra-fast
cooling at a low concentration of
cryoprotectants in a quartz micro-capillar: A
study using murine embryonic stem cells.
Cryobiology 56 (3), 223-232.
Jain, J.K., Paulson, R.J., 2006. Oocyte
cryopreservation. Fertility and Sterility 86,
1037-1046.
Mazur, P., 1990. Equilibrium, quasi-equilibrium, and
nonequilibrium freezing of mammalian
embryos. Cell Biophysics 14, 53-92.
Palasz, A., T, Mapletoft, R.J., 1996. Cryopreservation
of mammalian embryos and oocytes: Recent
advances. Biotechnology Advence 14, 127-149.
Polge, C., Smith, A.U., Parkes, A.S., 1949. Revival of
spermatozoa after vitrification and dehydration
at low temperatures. Nature 164, 666-667.
Rall, W.F., Fahy, G.M., 1985. Ice-free cryopreser-vation of mouse embryos. Nature 313, 573-574.
Risco, R., Elmoazzen, H., Doughty, M., He, X.,
Toner, M., 2007. Thermal performance of
quartz capillaries for vitrification. Cryobiology
55, 222-229.
Sağırkaya, H., BağıĢ, H., 2003. Memeli
embriyolarının kriyoprezervasyonu. Uludağ
Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi 22 (1-2-3), 127-135.
Whittingham, D.G., Leibo, S.P., Mazur, P., 1972.
Survival of mouse embryos frozen to –196 and
– 269°C. Science 178, 411-414.
Wilmut, I., Rowson, L., 1973. The successful low
temperature preservation of mouse and cow
embryos. Journal Reproduction Fertility 33,
352-353.
Wowk, B., 2010. Thermodynamic aspects of
vitrification. Cryobiology 60, 11-22

Thank you for copying data from http://www.arastirmax.com