Buradasınız

SIÇAN BEYİN G PROTEİNLERİNİN KARAKTERİZASYONU

Journal Name:

Publication Year:

Keywords (Original Language):

Abstract (Original Language): 
Heterotrimerik guanin nükleotit bağlayan proteinler (G proteinler) hücre sinyal iletiminde önemli rol oynamaktadır. Hücre zarının sitoplazmaya bakan yüzeyinde yerleşik G proteinleri α, β, γ alt birimlerinden oluşmaktadır. α alt birimi guanin nükleotit (GTP ve GDP) bağlama ve GTP’yi hidrolizleme (GTPaz) etkinliğine sahiptir. G proteinleri özgünlüklerini belirleyen α alt birimine göre Gs,Gi,Gq ve G12 olmak üzere 4 büyük alt gruba ayrılmıştır. Bu çalışmada sıçan beyninde GTP bağlama etkinliğini ölçmek için uygun koşullar belirlendi. Sıçan beyninden hazırlanan ham zar (P30) ve zar özüt (S142) kesimlerinde GTP bağlama etkinliği GTP’nin hidrolizlenmeyen analogu [35S] GTPγS ile ölçüldü. GTPγS bağlama etkinliğinin zamana ve protein derişimine bağlı olarak arttığı ve 60mM MgCl2 varlığında maksimum olduğu saptanmıştır. Western emdirim yöntemi kullanılarak beyinde Gα ve β γ altbirimleri, beyin korteksinde Gαo ve Gαi proteinlerinin ekspresyonları gösterilmiştir.
200-205

REFERENCES

References: 

1. Morris A, Malbon CC. Physiological regulation of G
protein-linked signaling. Physiological Reviews 1999;
79: 1373-1430.
2. Vaughan M. Signalling by heterotrimeric G proteins
Minireview Series. J.Biol.Chem. 1996; 273: 667-672.
3. Gilman AG. G proteins: Transducers of receptorgenerated
signals. Annu. Rev. Biochem. 1987; 56: 615-
649.
4. Hermans E. Biochemical and pharmacological control of
multiplicity of coupling at G-protein-coupled receptors.
Pharmacology and Therapeutics 2003; 99: 25- 44.
5. Mesters JR, Hogg T, Hilgenfeld R. G Proteins.
Encylopedia of Life Sciences 2001; 1-6.
6. Milligan G. Signal sorting by G-protein-linked receptors.
Adv. Pharmacol. 1995; 32: 1-29.
7. Chen J, Iyengar R. Inhibition of cloned adenylyl cyclases
by mutant-activated Gi-alpha and specific suppression of
type 2 adenylyl cyclase inhibition by phorbol ester
treatment. J.Biol.Chem. 1993; 267: 12253-12256.
8. Nathanson NM. Muscarinic acetylcholine receptors.
9. Milligan G, White JH. Protein-protein interactions at G -
protein coupled receptors. Trends in Pharmacol. Sci.
2001; 22: 513-518.
10. Hulme EC. Interaction of muscarinic acethylcholine
receptors with G proteins. In Receptor-Effector Coupling,
A Practical approach, Oxford, IRL press, 1990; 1-100.
11. Lowry O, Rosebrough H, Farr Al, Randall RJ .Protein
measurement with the folin phenol reagent. J. Biol.
Chem. 1951; 193: 265-275.
12. Northrup JK, Smigel MD, Gilman AG. The guanine
nucleotide activating site of the regulatory component of
adenylate cyclase. J. Biol. Chem. 1982; 257: 11416-
11423.
13. Laemli UK. Cleaveage of structral proteins during the
assembly of the head + of bacteriophage T4. Nature
1970; 278: 364-365.
14. Mumby SM, Gilman AG. Synthetic peptide antisera with
determined specifity for G- protein α or β subunits.
Johnson, R.A., Corbin, JD. (Ed): In Methods. Enzymol.
Sandiego Academic Press, 1991; 195: 215-223.
15. Hombuger V, Brabet P, Audigier Y, Pantaloni C,
Bockaert J, Rouot P. Immunological localization of the
GTP binding protein Go in different tissues of
vertebratesand invertebrates. Mol. Pharmacol 1987; 31:
313-319.
16. Grant KR, Harnett MM, Milligan G, Harnett W.
Characterization of heterotrimeric G-proteins in adult
Acanthocheilonema vitae. Biochem J. 1996; 320: 459-
466.
17. Otto H, Buchner K, Beckmann R, Hilbert R and Hucho F.
GTP-binding proteins in bovine brain nuclear
membranes. Neurochem.Int. 1992; 21: 409-414.
18. Angela G-J, Richard CF, Bengt W and Johan F.
Autoradiographic Characterisation of [35S] GTPγS
Binding Sites in Rat Brain. Neurochem. Res. 1997; 22, 8:
1055-1063.
19. Brann MR, Collins RM, Spiegel A. Localization of
mRNAs encoding the α subunits of signal-transducing G
proteins within rat brain and among peripheral tissues.
FEBS Letters 1987; 222: 191-198.

Thank you for copying data from http://www.arastirmax.com