Buradasınız

Anasayfa » Content

KOÇLARDA SULANDIRICI OZMOLARITESI, SOĞUTMA ORANI, SULANDIRMA ORANI VE GLISEROL EKLEME ZAMANININ ERITME SONRASI SPERMATOLOJIK ÖZELLiKLER VE FERTiLiZASYON ÜZERiNE ETKiLERi

Effects of Extender Osmolarity, Cooling Rate, Dilution Rate and Glycerol Addition Time on Post-thaw Ram Semen Characteristics and Fertilization

Journal Name:

  • İstanbul Üniversitesi Veteriner Fakültesi Dergisi

Publication Year:

  • 2010

Key Words:

Keywords (Original Language):

Author NameUniversity of AuthorFaculty of Author
Abstract (2. Language): 
Tree experiments were designed to optimize ram semen cryopreservation and to examine the effect of the extender B osmolarity, extension time with extender A and B, presence of glycerol in freezing media, cooling rate from 30˚C to 5°C, and dilution rate on post-thaw ram semen characteristics and fertilization. Ram ejaculates of thick consistency with rapid wave motion (>+++) and >70% initial motility were pooled. Pooled semen was diluted with Tris based extender using a two -step dilution method. Semen motility and morphology related parameters were assessed at the following five steps : (1) Fresh, (2) after dilution with extender A, (3) at 5 C, (4) after equilibration, and (5) after thawing at 37 C for 30 min. The extender osmolarity affected significantly post-thaw semen motility, defected acrosomes (DA) and total morphological defect (TMD), generally. There was a significant interaction between the osmolarity, cooling rates, glycerol addition time and first dilution time, on post-thaw motility, DA and TMD. Higher fertilization rates were obtained in fresh semen and Group 15 compared to Group 21 (P<0.05). In conclusion, cooling rate, extender osmolarity, presence of glycerol, dilution time with extender A and B, and dilution rates interact on post-thaw semen parameters. Glycerol included freezing media improves post-thaw semen recovery. Also, increasing the extender osmolarity resulted better post-thaw semen motility especially in the group frozen without glycerol. Post-thaw semen parameters not affected by cooling and glycerol addition time regimes, generally. Obtained data showed that presence of glycerol in freezing media have a negative effect on embryonic development and it was observed that frozen ram semen at high osmolarity without glycerol could be used for in vitro fertilization.
Bookmark/Search this post with
Abstract (Original Language): 
Koç spermasının dondurulmasını optimize etmek ve sulandırıcı B ozmolaritesi, sulandırıcı A ve B ile sulandırma zamanı, dondurma medyumunda gliserolün varlığı veya yokluğu, +30°C’den +5°C’ye soğutma oranı ve sulandırma oranının eritme sonrası spermatolojik özellikler ve fertilite üzerine olan etkilerini belirlemek amacıyla üç deney planlandı. İyi bir kitle hareketine(>+++) ve >%70 başlangıç motilitesine sahip olan koç ejekülatları çalışmaya dahil edilerek pooling yapıldı. Sperma motilitesi ve morfolojisi ile ilgili parametreler (1) taze, (2) sulandırıcı A ile sulandırdıktan sonra, (3) 5°C’ye soğutulduktan sonra, (4) ekilibrasyon sonrası ve (5) eritme sonrasında incelendi. Sulandırıcı ozmolaritesi eritme sonrası motiliteyi, kusurlu akrozom oranını ve toplam morfolojik bozukluk oranını önemli derecede etkiledi. Ozmolarite,soğutma oranı, gliserol ekleme zamanı ve ilk sulandırma zamanı ile eritme sonrası motilite, kusurlu akrozom oranı ve toplam morfolojik bozukluk oranları arasında önemli bir ilişki bulundu. Grup 21 ile karşılaştırıldığında taze sperma ve grup 15’te önemli derecede daha yüksek fertilizasyon oranı elde edildi. Sonuç olarak, soğutma oranı, sulandırıcı ozmolaritesi, gliserol varlığı, sulandırıcı A ve B ile sulandırma zamanı ve sulandırma oranları ile eritme sonrası spermatolojik özellikler arasında önemli bir etkileşim bulundu. Bunun yanında sulandırıcı ozmolaritesinin artırılması, özellikle gliserol katılmayan gruplarda daha iyi eritme sonrası motilite eldesi ile sonuçlandı. Eritme sonrası spermatolojik özellikler soğutma zamanı ve gliserol ilave zamanından etkilenmedi. Elde edilen sonuçlar, dondurma medyumunda gliserol varlığının embriyonik gelişim üzerinde olumsuzbir etkisinin olduğunu ve gliserol ilave edilmeksizin yüksek ozmolariteli sulandırıcılar ile dondurulmuş koç spermasının in vitro fertilizasyonda kullanılabileceğini gösterdi.
FULL TEXT (PDF): 
PDF icon arastirmax-koclarda-sulandirici-ozmolaritesi-sogutma-orani-sulandirma-orani-gliserol-ekleme-zamaninin-eritme-sonrasi-spermatolojik-ozellikler-fertilizasyon-uzerine-etkileri.pdf
  • 2
33-46
  • English

REFERENCES

References: 

Abdelhakeam, A.A., Graham, E.F., Vazquez, I.A,
1991. Studies on the absence of glycerol in
unfrozen and frozen ram semen: Fertility trials
and the effect of dilution methods on freezing
ram semen in the absence of glycerol.
Cryobiology, 28: 36-42.
Ali, S., Ahmed, N., Samad, H.A., Ahmad, K.M.,
Naz, A.N., Nawaz, M., Akhtar, N., 1992.
Effects of various glycerolization temperatures
and equilibration periods on freezability of ram
spermatozoa. Pakistan Vet J, 12: 142-144.
Bacinoglu, S., Cirit, Ü., Nur, Z., Ak, K., 2007.
Eritilmiş koç spermasında farklı gliserol katma
tekniklerinin ve soğutma hızının spermatolojik
özelliklere etkisi. İst.Ü.Vet.Fak.Derg, 33: 11-21.
Birler, S., Pabuççuoğlu, S., Aklan, S., Özdaş, Ö.B.,
Atalla, H., Ġleri, Ġ.K., 2002. İn vitro
fertilizasyonla elde edilen koyun embriyolarının
blastosist dönemine kadar geliştirilmesi, Turk J
Vet Anim Sci, 26: 891-894.
Coyan K., Aksoy M., Tekeli T., Ayar A., Ataman
M.B., 1992. Die intrauterine Besamung von
Schafen unter Anwendung des tiefgefrorenen
Spermas mit Hilfe der Laparoskopie.
Hayvancilik Arastırma Dergisi, 2: 15-17.
De Leeuw, F. E., De Leeuw, A. M., Den Daas, J. H.
G., Colenbrander, B., Verkleij, A. J., 1993.
Effects of various cryoprotective agents and
membrane-stabilizing compounds on bull sperm
membrane integrity after cooling. Cryobiology,
30: 32–44.
Dhami, AJ., Sahni, K.L., Mohan, G., 1992. Effect of
various cooling rates (from 30°C to 5°C) and
thawing temperatures on the deep-freezing of
Bos Taurus and Bos Bubalis semen,
Theriogenology, 38: 565–574.
Fabbrocini, A., Del Sorbo, C., Fasano, G., Sansone.
G., 2000. Effect of differential addition of
glycerol and pyruvate to extender on
cryopreservation of Mediterranean buffalo (B.
bubalis) spermatozoa. Theriogenology, 54:
193–207.
Fiser, P., Fairfull, R.W., 1984. The effect of glycerol
concentration and cooling velocity on
cryosurvival of ram spermatozoa frozen in
straws. Cryobiology, 21: 542-551.
Fiser, P.S., Ainsworth L., Fairfull, R.W., 1987.
Evaluation of a new diluent and different
processing procedures for cryopreservarion of
ram semen. Theriogenology, 28: 599-607.
Gunay, U., Dogan, I., Nur, Z., Manolov, I.,
Sagırkaya, H., Soylu, M.K., Kaptan, C.,
Akpınar, L., 2006. Influence of bull seminal
plasma on post-thaw ram semen parameters and
fertility. Bull. Vet. Inst. Pulawy, 50: 5003-5007.
Hammadeh, M.E., Askari, A., Gerorg, T.,
Rosenbaum, P., Schmidt, W., 1999. Effect of
freeze-thawing procedure on chromatin
stability, morphological alteration and
membrane integrity of human spermatozoa in
fertile and subfertile men. Int J Androl, 22:155–
62.
Hancock, J.L., 1952. The morphology of bull
spermatozoa. J Exp Biol, 29: 445-453.
Henry, M.A., Noiles, E.E., Gao, D., Mazur, P.,
Critser, J.K., 1993. Cryopreservation of human
spermatozoa. IV. The effects of cooling rate and
warming rate on the maintenance of motility,
plasma membrane integrity, and mitochondrial
function. Fertil Steril, 60: 911-8.
Ġleri, Ġ.K., Ak, K., Pabuççuoğlu, S., Birler, S., 2000.
Reprodüksiyon ve Sun’i Tohumlama. İstanbul
Üniv. Vet. Fak. Yayını. Ders Notu No: 23..
Kakadiya, P.T., Kavani, F.S., 1995. Comparative
efficiency of different dilutors for preservation
of Patanwadi ram semen at refrigeration
temperature. Indian J Anim Reprod, 16: 53-56.
Liu, Z.S., Foote, R.H., Brockett, C.C., 1998. Survival
of bull sperm frozen at different rates in media
varying in osmolarity. Cryobiology, 37: 219-230.
Maxwell, W.M.C., Landers, A.J., Evans, G., 1995.
Survival and fertility of ram spermatozoa frozen
in pellets, straws and minitubes.
Theriogenology, 43: 1201-1210.
Nur, Z., Zik, B., Ustuner, B., Sagirkaya, H.,
Ozguden, C.G., 2010. Effects of different
cryoprotective agents on ram sperm
morphology and DNA integrity.
Theriogenology, 73: 1267-1275.
Pérez-Pé, R., Grasa, P., Fernandez-Juan, M.,
Peleato, M.L., Cebrián-Pérez, J.A., Muiño-Blanco, T., 2002. Seminal plasma proteins
reduce protein tyrosine phosphorylation in the
plasma membrane of cold-shocked ram
spermatozoa. Mol Reprod Dev, 61: 226–33.
Salamon, S., Maxwell, W.M.C., 1993. Frozen storage
of ram semen. II. Causes of low fertility after
cervical insemination and methods of
improvement. Anim Reprod Sci, 38: 1–36.
Sanches-Partida, L.G., Maxwell, W.M.C., Pateg,
L.G., Setchell, B.P., 1992. Proline and glycine
betaine in the cryoprotective diluents for ram
spermatozoa. Reprod Fertil Dev, 4: 113-118.
Sayre, B.L., Lewis, G.S., 1997. Fertility and ovum
fertilisation rate after laparoscopic or
transcervical intrauterine artificial insemination
of oxytocin-treated ewes. Theriogenology, 48:
267-275.
Schiller, J., Arnhold, J., Glander, H.J., Arnold, K.,
2000. Lipid analysis of human spermatozoa and
seminal plasma by MALDI-TOF mass
spectrometry and NMR spectroscopy-effects of
freezing and thawing. Chem Phys Lipids, 106:
145–56.
Soylu, M.K., Nur, Z. Ustuner, B., Dogan,
I.,Sagırkaya, H., Gunay, U., Ak, K., 2007.
Effects of various cryoprotective agents and
extender osmolarity on post-thaw ram semen.
Bull Vet Inst Pulawy, 51: 241-246.
Varisli, O., Uguz, C., Agca, C., Agca, Y., 2008.
Motility and acrosomal integrity comparisons
between electro-ejaculated and epididymal ram
sperm after exposure to a range of an isosmotic
solutions, cryoprotective agents and low
temperatures. Anim Reprod Sci, 110: 256–68.
Woelders, H., Matthijs, A., Engel, B., 1997. Effects
of trehalose and sucrose, osmolarity of the
freezing medium, and cooling rate on viability
and intactness of bull sperm after freezing and
thawing, Cryobiology, 35: 93–105.
Yildiz, C., Kaya, A., Aksoy, M., Tekeli, T., 2000.
Influence of sugar supplementation of the
extender on motility, viability and acrosomal
integrity of dog spermatozoa during freezing.
Theriogenology 54: 579–585.

Thank you for copying data from http://www.arastirmax.com